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【摘要】:油菜素内酯(BR)对作物的各生长阶段都有调节作用,也能影响核酸类物质的代谢,还能延缓植物离体细胞的衰老。植物激素亦称植物天然激素或植物内源激素。是指植物体内产生的一些微量而能调节(促进、抑制)自身生理过程的有机化合物。植物激素六项: 细胞分裂素(CTK)、 脱落酸(ABA)、 乙烯(ETH)赤霉素(G A) 、油菜素内酯(BR)、吲哚乙酸(IAA)、独脚金内酯(SLs)。
检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被油菜素内酯(BR)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的油菜素内酯(BR)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法:
1. 样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3. 植物萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测。
4. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂盒组成:(检测范围请以新版说明书为准)
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 保存 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 2-8℃ |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 2-8℃ |
稀释液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 2-8℃ |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
底物B | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
终止液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
封板膜 | 2张 | 2张 | 2-8℃ |
说明书 | 1份 | 1份 | 2-8℃ |
自封袋 | 1个 | 1个 | 2-8℃ |
注意:使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。
试剂盒性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:1.0 pmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月