销售白介素ELISA试剂盒
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参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2024-10-05 15:25:49
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上海笃玛生物科技有限公司

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产品简介

大鼠白介素18(IL-18) ELISA试剂盒质量稳定,准确性高。笃玛生物不仅全程提供技术指导,确保您实验结果的准确性还提供免费代测服务。您只需提供代测样本,七个工作日内即可为您提供代测数据。欢迎前来咨询,订购。

详细介绍

大鼠白介素18(IL-18) ELISA试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被活性氧簇(ROS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧簇(ROS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。

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样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1.酶标仪(450nm)

2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱


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试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本xishi液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、30、60、120、240、480 U/ml。

洗板方法

1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。


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大鼠白介素18(IL-18) ELISA试剂盒操作步骤

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。

3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本xishi液40μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。


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试剂盒性能

1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2.灵敏度:检测浓度小于1.0 U/ml。

3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.有效期:6个月。

免责声明

1.试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。


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